Биохимия: руководство к практическим занятиям: учебное пособие для студентов учреждений высшего профессионального образования, обучающихся по специальностям 060108. 65 "Фармация" и 060101.65 "Лечебное дело" по дисциплине "Биохимия"

Содержание Список сокращений и условных обозначений ....................................................4 Техника безопасности при работе в биохимической лаборатории...................5 Раздел 1: Аминокислоты и простые белки ........................................................10 1.1 Проверка знаний по органической химии.....................................................11 1.2. Цветные реакции на белки и аминокислоты. Реакции осаждения и денатурации белков .............................................................................................12 1.3. Количественное определение белка биуретовым методом. Построение калибровочных кривых........................................................................................17 1.4. Диализ белков. Бумажная хроматография аминокислот.............................19 1.5. Коллоквиум I по теме «Аминокислоты и простые белки»..........................23 Раздел 2: Сложные белки, нуклеиновые кислоты и ферменты......................29 2.1 Действие амилазы на крахмал. Влияние температуры на активность амилазы.................................................................................................................30 2.2. Количественное определение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови с п-нитрофенилфосфатом .......................................................33 2.3. Коллоквиум II по теме: «Сложные белки, нуклеиновые кислоты и ферменты»............................................................................................................37 162 Раздел 3: Витамины, липиды, гормоны .............................................................44 3.1. Количественное определение витаминов С и Р...........................................44 3.2. Спектрофотометрическое определение НАДН(Н+) и расчёт чистоты коммерческого препарата ....................................................................................48 3.3. Влияние гормонов на содержание глюкозы в крови...................................51 3.4. Коллоквиум III по теме «Витамины, липиды, гормоны»............................53 Раздел 4: Метаболизм. Биоэнергетика клеток. Химия и обмен углеводов ...62 4.1. Специфичность действия ферментов распада углеводов: амилазы и сахаразы................................................................................................................63 4.2. Количественное определение глюкозы. Построение «сахарных кривых».65 4.3. Определение активности сукцинатдегидрогеназы в мышцах. Количественное определение пирувата в моче ..................................................69 4.4 Коллоквиум IV по теме: «Метаболизм. Биоэнергетика клеток. Химия и обмен углеводов».................................................................................................75 Раздел 5: Обмен липидов и его регуляция .........................................................81 5.1. Кинетика действия липазы. ..........................................................................82 5.2. Количественное определение фосфатидилхолинов (лецитинов) по фосфору ................................................................................................................85 5.3. Количественное определение холестерина в сыворотке крови ..................89 5.4. Количественное определение малонового диальдегида .............................91 5.5. Коллоквиум по теме «Обмен липидов» .......................................................94 Раздел 6: Переваривание белков и обмен аминокислот ................................100 6.1. Количественный анализ желудочного сока. Определение свободной, связанной, общей соляной кислоты и общей кислотности желудочного сока. .............................................................................................................................102 6.2. Количественное определение аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы в сыворотке крови ..................................................104 6.3. Доказательство проявления активности аланин-аминотрансферазы (АлАТ) методом бумажной хроматографии ..................................................................107 6.4. Экспресс-метод определения повышенного содержания фенилаланина в плазме крови.......................................................................................................109 6.5. Количественное определение мочевины в моче ферментативным уреазным/фенол-гипохлоритным методом.......................................................111 6.6. Количественное определение креатинина в моче .....................................114 6.7. Коллоквиум по теме: «Обмен простых белков»........................................117 Раздел 7: Обмен хромопротеинов и нуклеопротеинов. Биохимия крови и мочи. Биосинтез нуклеиновых кислот и белков. ............................................124 7.1. Определение общего билирубина в сыворотке крови...............................125 7.2. Количественное определение мочевой кислоты в моче............................127 7.3. А. Определение активности -амилазы в моче .........................................129 7.3. Б. Составные части мочи в норме и при патологии ..................................130 7.4. Определение активности холинэстеразы в сыворотке крови ...................134 7.5. Определение активности лактатдегидрогеназы в сыворотке крови........137 7.6. Коллоквиум по теме: «Обмен хромопротеинов и нуклеопротеинов. Биохимия крови и мочи. Биосинтез нуклеиновых кислот и белка»................139 Раздел 8: Подготовка к экзамену.......................................................................146 8.1.Пример экзаменационного тестового задания по курсу биохимии...........148 8.2. Ответы к экзаменационному тесту.............................................................158 163 Раздел 9: Приложения.........................................................................................159 9.1. Термины, различающиеся по смыслу, но сходные по написанию и звучанию.............................................................................................................159 9.2. Стандартные биохимические наборы и реактивы, используемые в практикуме .........................................................................................................160 9.3. Рекомендуемая литература .........................................................................161